表达去糖基化GP5的灭活猪繁殖与呼吸综合

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近几年，国内越来越多养殖场使用猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗来防控PRRS，然而猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗免疫保护效果也存在很大争议。灭活疫苗的免疫保护效果跟毒株、抗原含量、佐剂和免疫途径都有较大关系，所以我们对灭活疫苗的免疫保护效果的认知还存在较大代沟。今天推荐一篇文章，希望能够拓展我们对猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗的认知。该文章介绍了通过反向遗传技术构建了一株去糖基化GP5的PRRSV突变病毒株，FL12/GP5DM，并用于生产灭活疫苗并对其免疫效果进行了评估。

试验分组：G1，野毒株FL12灭活苗单次免疫组；G2，野毒株FL12灭活苗两次免疫组；G3，突变株FL12/GP5DM灭活苗单次免疫组；G4，突变株FL12/GP5DM灭活苗两次免疫组；G5，对照组。

研究显示，在接种疫苗后6周，只有在接种了灭活突变病毒组（G3和G4组）中观察到中和抗体（SN抗体）。然而，SN抗体在8周消失，持续时间很短。与只接种一次G3组相比，接种两次灭活突变病毒G4组的SN抗体滴度要高得多，并且维持的时间更长。在接种灭活野毒株病毒组（G1和G2）和对照组G5中均未观察到SN抗体。接种两次灭活突变病毒G4组的SN抗体在攻毒后第4天被重新激活，第8天后抗体滴度达到1：16并持续到实验结束。在接种两次灭活野毒株病毒G2组中，攻毒后第10天也检测到SN抗体，在攻毒后第13天达到滴度1：8。在攻毒试验期，G1、G3和G5组仔猪的血清样本中均未检测到PRRSV特异性SN抗体。

图1接种疫苗和攻毒后PRRSV特异性SN抗体滴度

四个攻毒组（G1-G3、G5）在攻毒后第2天时均出现明显的病毒血症，G4组仔猪在攻毒后第3天出现迟发性病毒血症。虽然所有攻毒组的病毒血症逐渐增加，并在攻毒后第5天达到峰值，但G4组的病毒血症的大小和持续时间明显低于其他组。G4组的病毒血症迅速下降，并在攻毒后第8天检测不到。然而，其他组的病毒血症持续时间更长（第10-13天）。

图2攻毒后血清中的病毒血症

组织病理学检查显示，四组仔猪（G1-G3、G5）均为中度间质性肺炎，肺泡间隔厚度明显增加，淋巴细胞浸润，G4组仔猪为轻度肺炎，平均肺泡间隔为15μm，淋巴细胞浸润最低。

图4组织病理学检查

总结，GP5主要中和表位附近N-糖基化位点的双氨基酸替换显著提高了PRRSV的免疫原性，特别是SN抗体反应，并迅速降低了血清中的病毒载量。突变病毒FL12/GP5DM能够作为PRRSV的灭活候选疫苗。虽然基于突变株的单次接种灭活PRRSV疫苗可诱导体液免疫反应，但是灭活疫苗的加强免疫能诱导更强的体液免疫反应。

参考文献：Protectivehumoralimmuneresponseinducedbyaninactivatedporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusexpressingthehypo-glycosylatedglycoprotein5

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